Blood RNA Mini Kit

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Product information

The Blood RNA Mini Kit is ideal for the isolation of RNA from fresh whole blood or EDTA- or citrate-stabilized samples. Our column-based kit contains a lysis buffer that is optimized for efficient digestion of blood samples and simultaneously inhibits RNases. Integrated DNA filtering enables RNA isolation in only 45-60 min without DNA digestion. Our RNA Mini Kit has an excellent RNA binding capacity of over 20 µg and allows fast and effective RNA isolation of the highest quality (ratio A260/A280: 1.7 - 2.0). Your samples can be stored at -20°C for a longer period of time before lysis.

Properties

Fast isolation - in only 45 - 60 min
Easy handling - Column-based RNA isolation
High yield - Binding capacity > 20 µg RNA (depending on type/amount of sample material)
Good throughput - Suitable for 0.5 - 1 ml whole blood
High purity - A260/A280 ratio: 1.7 - 2.0
High safety - Without the use of toxic substances such as phenol, DTT, beta-mercaptoethanol

Good to know

Originally, RNA purification methods were based on a two-phase extraction followed by alcohol precipitation of the RNA (e.g. phenol-chloroform-isoamyl alcohol extraction). This method uses phenol and chloroform to lyse the cells. For extractions, it is important to find the perfect ratio between sample and extractant. If too little extractant is used in relation to the sample, the ionic strength and pH will shift, reducing the purity of the isolated RNA. Whole blood has a higher buffering effect, which is why shifts in pH can also occur with conventional methods, making it difficult to isolate high-quality RNA with high yields. Our Blood RNA Mini Kit offers a fast, simple and effective method for isolating RNA from blood.

Our Blood RNA Mini Kit is based on a column-based adsorption of RNA without the use of toxic substances such as phenol or chloroform. After lysis of the whole blood, genomic DNA is removed by integrated filtration. Additional DNase digestion of the DNA is not necessary. The RNA is then reversibly bound to a silica centrifugation column in a second filtration step. Contamination can be removed here by washing steps. Finally, the total RNA is eluted with RNase-free water and can be used directly for downstream applications, such as quantitative PCR.

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FAQ

1. Nach der Extraktion keine RNA detektiert?

Falls Sie nach der Extraktion keine RNA detektieren können, kann es sein, dass die RNA zu gering konzentriert ist. Wir empfehlen Ihnen entweder die Menge des Ausgangsmaterials zu erhöhen oder die RNA nach der Extraktion zu fällen. Fällen Sie die RNA mit einer 30:1-Mischung aus absolutem Ethanol und 3M NaAcetat. Resuspendieren Sie die RNA, nach einem Waschschritt mit 70%-igem Ethanol, in 5-10 µl RNase freiem Wasser. Danach sollte Ihre RNA-Konzentration hoch genug sein um detektiert werden zu können.

2. Das RNA-Pellet haftet nicht an der Tube-Oberfläche?

Nach den Zentrifugationsschritten ist es wichtig das RNA-Pellet vollständig zu trocknen. Falls das RNA-Pellet fest an der Tube-Oberfläche haftet, können Sie das Tube invertiert auf ein Papiertuch stellen und einfach trocknen lassen. Manchmal haftet das RNA-Pellet aber nicht fest an der Tube-Oberfläche. Das ist ganz normal und hat keinen Einfluss auf die Qualität Ihrer RNA. Wir empfehlen Ihnen dann die Stelle Ihres RNA-Pellets von außen auf dem Tube zu markieren und erneut zu zentrifugieren (Wichtig: Drehen Sie das Tube so, dass das RNA-Pellet nach oben zeigt). Wir empfehlen Ihnen den Überstand mit der kleinsten Pipette abzunehmen. Zusätzlich können Sie das Pellet im Heizblock 15 min bei 37°C trocknen.

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