Terreno IZ senza siero, 1 litro

Terreno per cellule immunitarie IZ senza siero

 

Il terreno IZ di Bio&SELL è un terreno ottimizzato senza siero per la coltivazione e la propagazione efficace di cellule immunitarie umane (cellule T, NK, CIK e LAK) in vitro - "pronto all'uso"!
Per voi, "pronto all'uso" significa:

    Nessuna integrazione costosa (con il siero)
    Nessuna necessità di effettuare test sul siero che richiedono molto tempo
    Nessuna variazione da lotto a lotto
    Rischio di contaminazione significativamente inferiore
    Risparmio di tempo
    Risultati affidabili e assolutamente riproducibili

 
Composizione del terreno di coltura IZ:

La base del terreno IZ è costituita dal terreno RPMI 1640 e dal terreno DMEM-F12, arricchiti con l'aggiunta di sali speciali, oligoelementi, albumina, colesterolo, lipidi e vitamine. Il terreno IZ non contiene deliberatamente fattori di crescita (come citochine ricombinanti) per la differenziazione cellulare o l'arricchimento di cellule T da campioni di sangue intero. Questi possono quindi essere aggiunti in base alle esigenze individuali.

Campi di applicazione:

    Proliferazione di cellule T da cellule mononucleate del sangue periferico (PBMC)/sangue intero dopo stimolazione.
    Proliferazione di cellule NK, LAK e CIK dopo stimolazione.
    Coltivazione a lungo termine di cellule T immortalizzate

 
Coltura cellulare di cellule immunitarie

Le cellule del sangue periferico si arrestano nella fase G0 e devono essere stimolate con mitogeni (lectine vegetali, ad es. fitoemoagglutinina PHA; o anticorpi come gli anti-CD3 ) per poter essere coltivate per un certo tempo nella coltura cellulare.

Suggerimenti per la stimolazione delle cellule T:

    Densità di cellule T di 1x105/ ml
    Aggiungere PHA secondo le istruzioni del produttore (1-5 μg/ml).
    Il tempo di incubazione è compreso tra 48 e 72 ore (a seconda del tipo e dell'origine dei linfociti e del loro utilizzo).
    Per continuare la coltura è necessaria l'aggiunta di terreno IZ fresco e un'ulteriore stimolazione delle cellule T.

 

Attenzione: il tasso di proliferazione dei linfociti primari da sangue intero è limitato.

Suggerimenti per la stimolazione/coltivazione di CIK

Le CIK vengono arricchite aggiungendo IFN-γ, mAb anti-CD3 (OKT3) e IL-2 a PBMC (cellule mononucleate del sangue periferico) isolate. Dopo 2-3 settimane di coltura in vitro, la loro concentrazione aumenta di 1000 volte.

 

Temperatura di conservazione: da +2°C a +8°C al buio.

Durata di conservazione: 10 mesi dalla data di produzione

Il terreno IZ arricchito con integratori/fattori di crescita deve essere conservato a 2-8°C al buio, evitando scongelamenti e congelamenti frequenti e proteggendolo dalla luce.