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RNA Mini Kit, 50 Reaktionen

RNA Mini Kit, 50 Reaktionen
199,00 €
Inhalt: 50 Reaktionen

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Produktinformationen


Unser RNA Mini Kit wurde speziell für die Isolierung von Total-RNA aus Gewebeproben, Zellen, Bakterien und Biopsien entwickelt. Unser säulenbasierter Kit beinhält einen Lysepuffer, der für den effizienten Aufschluß unterschiedlicher Ausgangsmaterialien optimiert ist und gleichzeitig RNasen inhibiert. Durch integriertes Wegfiltern der DNA gelingt eine Isolierung der Total-RNA, ohne DNA-Verdau, in nur 15-30 min. Unser RNA Mini Kit besitzt eine hervorragende RNA-Bindungskapazität von ca. 100 µg und erlaubt eine schnelle sowie effektive Isolierung von Total-RNA in höchster Qualität (Ratio A260 / A280: 1.7 - 2.0).

Eigenschaften

Schnelle Isolation - In nur 15 - 30 min 
Einfache Handhabung - Säulenbasierte RNA-Isolierung 
Hohe Ausbeute - Bindungskapazität ca. 100 µg RNA (abhängig von Art/Menge des Probenmaterials)
Guter Durchsatz - Geeignet für bis zu 5 x 10e6 Zellen oder für Gewebeproben bis zu 20 mg
Hohe Reinheit - Ratio A260/A280: 1.7 - 2.0
Hohe Sicherheit - Ohne Verwendung giftiger Substanzen wie Phenol, DTT, beta-Mercaptoethanol

Gut zu wissen

Ursprüngliche RNA-Aufreinigungsverfahren basierten auf einer Zwei-Phasen-Extraktion gefolgt von einer Alkoholausfällung der RNA (z.B. Phenol-Chloroform-Isoamylalkohol-Extraktion). Diese Verfahren sind zeitaufwändig und, durch den Einsatz giftiger Substanzen wie z.B. Phenol, gefährlich. Zudem werden kurze RNA-Moleküle nur mit geringem Ertrag gewonnen. Unser RNA Mini Kit basiert auf einer Adsorption der RNA an Silikatsäulchen und bietet Ihnen eine schnelle, einfache und ungefährliche Alternative.

Um ihre RNA-Isolation noch effizienter zu machen haben wir folgende Tipps:

1. Inaktivierung von RNasen

Die größte Herausforderung bei der RNA-Isolierung stellen RNasen dar. RNasen verdauen RNA unspezifisch und kommen in Zellen und Geweben allgegenwärtig vor. Sorgen Sie deshalb für ein RNase-freies Laborumfeld und inaktivieren Sie die RNasen direkt bei der Probenvorbereitung (durch Verwendung von z.B. RNaseStop, Artikel-Nr.: BS.RS.1000). Oft wird dem Lysepuffer Mercaptoethanol oder Dithiothreitol hinzugefügt, um RNasen durch die Spaltung ihrer Disulfidbrücken zu inaktivieren. Beide Substanzen sind jedoch gesundheitlich bedenklich. Hier bietet unser RNA Mini Kit eine ungefährliche Alternative. Der Lysepuffer unseres RNA Mini Kits ist nicht nur optimiert für den effektiven Zellaufschluss, sondern auch für die Inhibierung von RNasen, ohne Einsatz giftiger Substanzen.

2. Menge des Probenmaterials

Entscheidend für eine erfolgreiche RNA-Isolierung ist auch die Menge und Qualität des Ausgangsmaterials. Zuviel oder verunreinigtes Probenmaterial verringert die Ausbeute und Reinheit durch unvollständige Zelllyse oder Verklumpungen in der Säule. Verwenden Sie für optimale Ergebnisse mit unserem RNA Mini Kit bis zu 20 mg Gewebe, 5 x 106 Zellen oder bis zu 1 × 109 Bakterien. Achten Sie auch darauf, dass Ihre Proben vollständig lysiert und homogenisiert sind bevor Sie sie auf die Säulen bringen, um optimale Erträge zu erzielen.

3. Entfernung von DNA-Kontaminationen

Ein weiteres Problem bei der RNA-Aufreinigung stellen DNA-Kontaminationen dar, die die Reinheit der RNA mindern. Herkömmliche RNA-Isolierungsmethoden entfernen DNA durch einen zusätzlichen, langwierigen DNase-Verdau. Unser RNA Mini Kit entfernt DNA effektiv, durch integriertes Wegfiltern der DNA, und spart Ihnen Zeit für andere Experimente oder eine Tasse Kaffee.

Weiterführende Links zu "RNA Mini Kit, 50 Reaktionen"
Publikationen


1. Jens Keilwagen, Michael Wenk, Jessica L. Erickson, Martin H. Schattat, Jan Grau, Frank Hartung, Using intron position conservation for homology-based gene predictionNucleic Acids Research, Volume 44, Issue 9, 19 May 2016, Page e89, https://doi.org/10.1093/nar/gkw092

FAQ


1. Nach der Extraktion keine RNA detektiert?

Falls Sie nach der Extraktion keine RNA detektieren können, kann es sein, dass die RNA zu gering konzentriert ist. Wir empfehlen Ihnen entweder die Menge des Ausgangsmaterials zu erhöhen oder die RNA nach der Extraktion zu fällen. Fällen Sie die RNA mit einer 30:1-Mischung aus absolutem Ethanol und 3M NaAcetat. Resuspendieren Sie die RNA, nach einem Waschschritt mit 70%-igem Ethanol, in 5-10 µl RNase freiem Wasser. Danach sollte Ihre RNA-Konzentration hoch genug sein um detektiert werden zu können.

2. Das RNA-Pellet haftet nicht an der Tube-Oberfläche?

Nach den Zentrifugationsschritten ist es wichtig das RNA-Pellet vollständig zu trocknen. Falls das RNA-Pellet fest an der Tube-Oberfläche haftet, können Sie das Tube invertiert auf ein Papiertuch stellen und einfach trocknen lassen. Manchmal haftet das RNA-Pellet aber nicht fest an der Tube-Oberfläche. Das ist ganz normal und hat keinen Einfluss auf die Qualität Ihrer RNA. Wir empfehlen Ihnen dann die Stelle Ihres RNA-Pellets von außen auf dem Tube zu markieren und erneut zu zentrifugieren (Wichtig: Drehen Sie das Tube so, dass das RNA-Pellet nach oben zeigt). Wir empfehlen Ihnen den Überstand mit der kleinsten Pipette abzunehmen. Zusätzlich können Sie das Pellet im Heizblock 15 min bei 37°C trocknen. 

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